Carbapenem-resistentiegen (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Productnaam
HWTS-OT045 Carbapenem-resistentiegen (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) Detectiekit (Fluorescentie-PCR)
Epidemiologie
Carbapenem-antibiotica zijn atypische β-lactam-antibiotica met het breedste antibacteriële spectrum en de sterkste antibacteriële activiteit.Vanwege zijn stabiliteit tegen β-lactamase en lage toxiciteit is het een van de belangrijkste antibacteriële geneesmiddelen geworden voor de behandeling van ernstige bacteriële infecties.Carbapenems zijn zeer stabiel tegen plasmide-gemedieerde β-lactamasen met een uitgebreid spectrum (ESBL's), chromosomen en plasmide-gemedieerde cefalosporinasen (AmpC-enzymen).
Kanaal
| PCR-mix 1 | PCR-mix 2 | |
| FAM | IMP | VIM |
| VIC/HEX | Interne controle | Interne controle |
| CY5 | NDM | KPC |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Technische parameters
| Opslag | ≤-18℃ |
| Houdbaarheid | 12 maanden |
| Voorbeeldtype | Sputum, zuivere kolonies, rectaal uitstrijkje |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0% |
| LoD | 103KVE/ml |
| Specificiteit | a) De kit detecteert de gestandaardiseerde negatieve bedrijfsreferenties en de resultaten voldoen aan de eisen van de overeenkomstige referenties. b) De resultaten van de kruisreactiviteitstest tonen aan dat deze kit geen kruisreactie vertoont met andere ademhalingspathogenen, zoals Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, Respiratoir adenovirus, Enterococcus, of monsters die andere geneesmiddelresistente genen CTX, mecA, SME, SHV, TEM, enz. bevatten. c) Anti-interferentie: Mucine, Minocycline, Gentamicine, Clindamycine, Imipenem, Cefoperazon, Meropenem, Ciprofloxacinehydrochloride, Levofloxacine, Clavulaanzuur en Roxithromycine worden geselecteerd voor interferentietests en de resultaten tonen aan dat de bovengenoemde interfererende stoffen geen interfererende reactie hebben voor de detectie van carbapenemresistentiegenen KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM en IMP. |
| Toepasselijke instrumenten | Applied Biosystems 7500 Realtime PCR-systemen QuantStudio®5 realtime PCR-systemen SLAN-96P Real-Time PCR-systemen (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) LightCycler®480 Real-Time PCR-systeem LineGene 9600 Plus realtime PCR-detectiesysteem (FQD-96A，HangzhouBioer-technologie) MA-6000 realtime kwantitatieve thermische cycler (Suzhou Molarray Co., Ltd.) BioRad CFX96 Real-Time PCR-systeem BioRad CFX Opus 96 Realtime PCR-systeem |
Werkstroom
Optie 1.
Aanbevolen extractiereagens: Macro & Micro-Test Algemene DNA/RNA-kit (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (kan worden gebruikt met Macro & Micro-Test Automatic Nucleic Acid Extractor (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) van Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Voeg 200 μl normale zoutoplossing toe aan het thallusneerslag.Bij de daaropvolgende stappen moeten de instructies voor extractie worden gevolgd, en het aanbevolen elutievolume is100 μl.
Optie 2.
Aanbevolen extractiereagens: Nucleïnezuurextractie- of zuiveringsreagens (YDP302) van Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. De extractie moet worden gestart in strikte overeenstemming met stap 2 van de gebruiksaanwijzing (voeg 200 μl buffer GA toe aan het thallusneerslag en schud totdat de thallus volledig is opgehangen).Gebruik RNase/DNase-vrij water voor elutie en het aanbevolen elutievolume is 100 μl.
Optie 3.
Aanbevolen extractiereagens: Macro- en microtestmonstervrijgavereagens.Het sputummonster moet worden gewassen door 1 ml normale zoutoplossing toe te voegen aan het bovengenoemde behandelde thallusprecipitaat, gedurende 5 minuten bij 13.000 omw/min te worden gecentrifugeerd, en het supernatant wordt weggegooid (bewaar 10-20 µl supernatant).Voeg voor zuivere kolonie- en rectale uitstrijkjes 50 μl monstervrijgavereagens rechtstreeks toe aan het bovengenoemde behandelde thallusneerslag en de daaropvolgende stappen moeten worden geëxtraheerd volgens de gebruiksaanwijzing.
