Carbapenemresistentiegen (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Productnaam
HWTS-OT045 Detectiekit voor carbapenemresistentiegenen (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (fluorescentie-PCR)
Epidemiologie
Carbapenem-antibiotica zijn atypische β-lactam-antibiotica met het breedste antibacteriële spectrum en de sterkste antibacteriële werking. Dankzij hun stabiliteit ten opzichte van β-lactamase en lage toxiciteit zijn ze uitgegroeid tot een van de belangrijkste antibacteriële geneesmiddelen voor de behandeling van ernstige bacteriële infecties. Carbapenems zijn zeer stabiel ten opzichte van plasmide-gemedieerde extended-spectrum β-lactamases (ESBL's), chromosomen en plasmide-gemedieerde cefalosporinasen (AmpC-enzymen).
Kanaal
| PCR-mix 1 | PCR-mix 2 | |
| FAM | IMP | VIM |
| VIC/HEX | Interne controle | Interne controle |
| CY5 | NDM | KPC |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Technische parameters
| Opslag | ≤-18℃ |
| Houdbaarheid | 12 maanden |
| Exemplaartype | Sputum, zuivere kolonies, rectale swab |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0% |
| LoD | 103CFU/ml |
| Specificiteit | a) De testkit detecteert de gestandaardiseerde negatieve referentiewaarden van het bedrijf, en de resultaten voldoen aan de eisen van de betreffende referentiewaarden. b) De resultaten van de kruisreactiviteitstest tonen aan dat deze kit geen kruisreactie vertoont met andere respiratoire pathogenen, zoals Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, respiratoir adenovirus, Enterococcus, of monsters die andere geneesmiddelresistente genen bevatten zoals CTX, mecA, SME, SHV, TEM, enz. c) Anti-interferentie: Mucine, minocycline, gentamicine, clindamycine, imipenem, cefoperazon, meropenem, ciprofloxacinehydrochloride, levofloxacine, clavulaanzuur en roxithromycine werden geselecteerd voor de interferentietest. De resultaten tonen aan dat de bovengenoemde interfererende stoffen geen interferentie veroorzaken bij de detectie van carbapenemresistentiegenen KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM en IMP. |
| Toepasselijke instrumenten | Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR-systemen QuantStudio®5 Real-Time PCR-systemen SLAN-96P Real-Time PCR-systemen (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) LightCycler®480 Real-Time PCR-systeem LineGene 9600 Plus Real-Time PCR-detectiesysteem (FQD-96A，HangzhouBioer-technologie) MA-6000 Real-Time Kwantitatieve Thermische Cycler (Suzhou Molarray Co., Ltd.) BioRad CFX96 Real-Time PCR-systeem BioRad CFX Opus 96 Real-Time PCR-systeem |
Werkstroom
Optie 1.
Aanbevolen extractiereagens: Macro & Micro-Test General DNA/RNA Kit (HWTS-301)9-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (die gebruikt kan worden met de Macro & Micro-Test Automatic Nucleic Acid Extractor (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) van Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Voeg 200 μL fysiologische zoutoplossing toe aan het thallusprecipitaat. De volgende stappen moeten worden uitgevoerd volgens de instructies voor extractie, en het aanbevolen elutievolume is100 μL.
Optie 2.
Aanbevolen extractiereagens: Nucleïnezuurextractie- of zuiveringsreagens (YDP302) van Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. De extractie dient strikt volgens stap 2 van de gebruiksaanwijzing te worden gestart (voeg 200 μL buffer GA toe aan het thallusprecipitaat en schud totdat de thallus volledig is gesuspendeerd). Gebruik RNase/DNase-vrij water voor de elutie; het aanbevolen elutievolume is 100 μL.
Optie 3.
Aanbevolen extractiereagens: Macro- & Micro-Test Sample Release Reagent. Het sputummonster moet worden gewassen door 1 ml fysiologische zoutoplossing toe te voegen aan het bovengenoemde behandelde thallusprecipitaat, te centrifugeren bij 13000 tpm gedurende 5 minuten, en het supernatant te verwijderen (bewaar 10-20 µl supernatant). Voor zuivere kolonies en rectale swabs voegt u 50 µl sample release reagens rechtstreeks toe aan het bovengenoemde behandelde thallusprecipitaat, en de verdere extractiestappen moeten worden uitgevoerd volgens de gebruiksaanwijzing.
