Carbapenemresistentiegen (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Productnaam
HWTS-OT045 Carbapenemresistentiegen (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) Detectiekit (fluorescentie-PCR)
Epidemiologie
Carbapenemantibiotica zijn atypische β-lactamantibiotica met het breedste antibacteriële spectrum en de sterkste antibacteriële activiteit. Vanwege de stabiliteit ten opzichte van β-lactamase en de lage toxiciteit is het een van de belangrijkste antibacteriële middelen geworden voor de behandeling van ernstige bacteriële infecties. Carbapenems zijn zeer stabiel ten opzichte van plasmide-gemedieerde breedspectrum β-lactamasen (ESBL's), chromosomen en plasmide-gemedieerde cefalosporinasen (AmpC-enzymen).
Kanaal
PCR-Mix 1 | PCR-Mix 2 | |
FAM | IMP | VIM |
VIC/HEX | Interne controle | Interne controle |
CY5 | NDM | KPC |
ROX | OXA48
| OXA23 |
Technische parameters
Opslag | ≤-18℃ |
Houdbaarheid | 12 maanden |
Exemplaartype | Sputum, zuivere kolonies, rectaal uitstrijkje |
Ct | ≤36 |
CV | ≤5,0% |
LoD | 103KVE/ml |
Specificiteit | a) De kit detecteert de gestandaardiseerde negatieve bedrijfsreferenties en de resultaten voldoen aan de vereisten van de overeenkomstige referenties. b) De resultaten van de kruisreactiviteitstest tonen aan dat deze kit geen kruisreactie vertoont met andere luchtwegpathogenen, zoals Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, respiratoir adenovirus, Enterococcus of monsters die andere medicijnresistente genen bevatten, zoals CTX, mecA, SME, SHV, TEM, enz. c) Anti-interferentie: Mucine, Minocycline, Gentamicine, Clindamycine, Imipenem, Cefoperazon, Meropenem, Ciprofloxacinehydrochloride, Levofloxacine, Clavulaanzuur, Roxithromycine zijn geselecteerd voor de interferentietest en de resultaten laten zien dat de bovengenoemde interfererende stoffen geen interfererende reactie vertonen op de detectie van carbapenemresistentiegenen KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM en IMP. |
Toepasselijke instrumenten | Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR-systemen QuantStudio®5 Real-Time PCR-systemen SLAN-96P Real-Time PCR-systemen (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) LightCycler®480 Real-Time PCR-systeem LineGene 9600 Plus Real-Time PCR-detectiesysteem (FQD-96A,HangzhouBioertechnologie) MA-6000 Real-Time Kwantitatieve Thermische Cycler (Suzhou Molarray Co., Ltd.) BioRad CFX96 Real-Time PCR-systeem BioRad CFX Opus 96 Real-Time PCR-systeem |
Werkstroom
Optie 1.
Aanbevolen extractiereagens: Macro & Micro-Test General DNA/RNA Kit (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (die gebruikt kan worden met de Macro & Micro-Test Automatic Nucleic Acid Extractor (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) van Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. Voeg 200 μl fysiologische zoutoplossing toe aan het thallusprecipitaat. Vervolgstappen dienen de extractie-instructies te volgen en het aanbevolen elutievolume is100 μL.
Optie 2.
Aanbevolen extractiereagens: Nucleïnezuurextractie- of zuiveringsreagens (YDP302) van Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. De extractie moet strikt volgens stap 2 van de gebruiksaanwijzing worden gestart (voeg 200 μl GA-buffer toe aan het thallusprecipitaat en schud tot het thallus volledig is gesuspendeerd). Gebruik RNase/DNase-vrij water voor de elutie; het aanbevolen elutievolume is 100 μl.
Optie 3.
Aanbevolen extractiereagens: Macro & Micro-Test Sample Release Reagent. Het sputummonster moet worden gewassen door 1 ml fysiologische zoutoplossing toe te voegen aan het bovengenoemde behandelde thallusneerslag, 5 minuten te centrifugeren met 13.000 tpm en de supernatant te verwijderen (houd 10-20 µl supernatant over). Voeg voor een zuivere kolonie en rectale swab 50 µl monsterreleasereagens rechtstreeks toe aan het bovengenoemde behandelde thallusneerslag en voer de volgende stappen uit volgens de gebruiksaanwijzing.