Mycobacterium Tuberculosis Nucleïnezuur en Rifampicine Resistentie
Productnaam
HWTS-RT074B-Mycobacterium Tuberculosis Nucleïnezuur- en Rifampicine-resistentiedetectiekit (smeltcurve)
Certificaat
CE
Epidemiologie
Mycobacterium tuberculosis, kortweg tuberkelbacil (TB), is de pathogene bacterie die tuberculose veroorzaakt. Momenteel zijn isoniazide, rifampicine en hexambutol de meest gebruikte eerstelijnsmedicijnen tegen tuberculose. De tweedelijnsmedicijnen tegen tuberculose zijn onder andere fluorochinolonen, amikacine en kanamycine. Nieuw ontwikkelde medicijnen zijn linezolid, bedaquiline en delamani. Door onjuist gebruik van tuberculosemedicijnen en de kenmerken van de celwandstructuur van Mycobacterium tuberculosis ontwikkelt Mycobacterium tuberculosis echter resistentie tegen tuberculosemedicijnen, wat ernstige uitdagingen oplevert voor de preventie en behandeling van tuberculose.
Rifampicine wordt sinds eind jaren zeventig op grote schaal gebruikt bij de behandeling van patiënten met longtuberculose en heeft een significant effect. Het is de eerste keuze geweest om de chemotherapie van patiënten met longtuberculose te verkorten. Rifampicineresistentie wordt voornamelijk veroorzaakt door de mutatie van het rpoB-gen. Hoewel er voortdurend nieuwe antituberculosemedicijnen op de markt komen en de klinische werkzaamheid van patiënten met longtuberculose ook is blijven verbeteren, is er nog steeds een relatief gebrek aan antituberculosemedicijnen en is het fenomeen van irrationeel medicijngebruik in de klinische praktijk relatief hoog. Uiteraard kan Mycobacterium tuberculosis bij patiënten met longtuberculose niet tijdig volledig worden gedood, wat uiteindelijk leidt tot verschillende graden van medicijnresistentie in het lichaam van de patiënt, het verloop van de ziekte verlengt en het risico op overlijden van de patiënt verhoogt.
Kanaal
Kanaal | Kanalen en fluoroforen | Reactiebuffer A | Reactiebuffer B | Reactiebuffer C |
FAM-kanaal | Verslaggever: FAM, Quencher: Geen | rpoB 507-514 | rpoB 513-520 | 38KD en IS6110 |
CY5-kanaal | Verslaggever: CY5, Quencher: Geen | rpoB 520-527 | rpoB 527-533 | / |
HEX (VIC)-kanaal | Verslaggever: HEX (VIC), Quencher: Geen | Interne controle | Interne controle | Interne controle |
Technische parameters
Opslag | ≤-18℃ In het donker |
Houdbaarheid | 12 maanden |
Exemplaartype | Sputum |
CV | ≤5,0% |
LoD | Mycobacterium tuberculosis 50 bacteriën/ml rifampicine-resistent wildtype: 2x103bacteriën/ml homozygote mutant: 2x103bacteriën/ml |
Specificiteit | Het detecteert het wilde type Mycobacterium tuberculosis en de mutatielocaties van andere resistentiegenen voor geneesmiddelen, zoals katG 315G>C\A, InhA-15C> T. De testresultaten tonen geen resistentie tegen rifampicine aan, wat betekent dat er geen kruisreactiviteit is. |
Toepasselijke instrumenten: | SLAN-96P Real-Time PCR-systemen BioRad CFX96 Real-Time PCR-systeem LightCycler480® Real-Time PCR-systeem |
Werkstroom
Als u de Macro & Micro-Test General DNA/RNA Kit (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (die kan worden gebruikt met Macro & Micro-Test Automatic Nucleic Acid Extractor (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) of Macro & Micro-Test Viral DNA/RNA Column (HWTS-3022-50) van Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. voor extractie gebruikt, voegt u 200 μL van de positieve controle, negatieve controle en verwerkte sputummonster toe die u in volgorde wilt testen, en voegt u 10 μL van de interne controle afzonderlijk toe aan de positieve controle, negatieve controle en verwerkte sputummonster die u wilt testen. De daaropvolgende stappen moeten strikt worden uitgevoerd volgens de extractie-instructies. Het geëxtraheerde monstervolume is 200 μL en het aanbevolen elutievolume is 100 μL.